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巨噬細胞儲存

產品屬性

  • 所屬分類:巨噬細胞儲存
  • 產品編號:
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  • 發布日期:2019-07-02
  • 產品概述
  • 性能特點
  • 技術參數

  成都細胞儲存—巨噬細胞

  以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細胞,令其對病原體作出反應。

  巨噬細胞也建有無限細胞系,大多來自小鼠,如P338D1、S774A.1、RAW309Cr.l等,均獲惡性,培養中呈巨噬細胞形態和吞噬功能,易于傳代和瓶壁分離,但難以建株。培養巨噬細胞可用各樣方法和各種來源來獲取細胞,以小鼠腹腔取材法Z為實用,其法如下:

  1、實驗前三天,向每只小鼠腹腔內注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內)。

  2、引頸殺死動物,手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3~5秒。

  3、置動物于解剖臺上,用針頭固定四肢,雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側,暴露出腹膜,但勿傷及腹膜壁。

  4、再用70%酒精擦洗腹膜壁后,用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中,同時從兩側用手指揉壓腹膜壁,令液體在腹腔內充分流動。

  5、用針頭輕輕挑起腹壁,使動物體微傾向一側,使腹腔中液體集于針頭下吸取入針管內。

  6、小心拔出針頭,把液體注入離心管中,250g4℃離心10分鐘,去上清,加10mlEagle培養基。

  7、計數細胞,每只小鼠可產生20~30×105細胞,其中90%為巨噬細胞。

  8、為獲取3×105帖附細胞/平方厘米,需接種2.5×106/ml。

  9、為純化培養細胞,去除其它白細胞,接種數小時后,去除培養液,用Eagle液沖洗1~2次后,再加新Eagle培養液置37℃,5%CO2溫箱中培養。

成都細胞儲存

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